1. 粪便样本采集前的准备
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工具清单：
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无菌粪便采集管（带密封盖）
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一次性无菌勺或拭子
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含保存液的运输培养基（如Cary-Blair、Amies培养基）
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生物安全袋与冰袋（如需冷藏）
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注意事项：
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避免接触马桶水或尿液，防止污染。
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采集后立即处理，延迟不超过1小时（常温下病原体易降解）。
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2. 培养基选择与处理
（1）常用运输培养基类型
| 培养基 | 特点 | 适用微生物 |
|---|---|---|
| Cary-Blair | 中性pH，维持沙门氏菌、志贺氏菌活性 | 肠道致病菌 |
| Amies | 含活性炭，吸附毒性物质 | 苛养菌（如弯曲杆菌） |
| 甘油缓冲液 | -80℃长期保存菌群结构 | 肠道宏基因组研究 |
（2）培养基分装步骤
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将2-5g粪便样本与3mL培养基混合（比例1:3）。
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均质化后分装至无菌EP管，预留1/3空间防冻裂。
3. 运输与保存条件
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短期运输（<24小时）：
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4℃冷藏（冰袋+泡沫箱），避免反复冻融。
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长期保存：
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-80℃超低温冷冻（需甘油缓冲液保护）。
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特殊要求：
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厌氧菌样本需预还原培养基并充氮气密封。
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4. 常见问题与解决方案
| 问题 | 原因 | 解决方法 |
|---|---|---|
| 样本干涸 | 密封不严或培养基不足 | 检查管盖密封性，确保液体完全覆盖样本 |
| 微生物死亡 | 温度波动或延迟处理 | 严格控温4℃，采集后立即处理 |
| 污染杂菌 | 采集工具非无菌或操作暴露 | 使用一次性无菌器材，在生物安全柜操作 |
5. 标准化操作流程（SOP）示例
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采集：用无菌勺取粪便中部（避免接触表面）。
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混合：将样本加入含5mL Cary-Blair培养基的管中，涡旋10秒。
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标记：注明采集时间、患者ID及保存条件。
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运输：4℃环境下24小时内送检，或-80℃冻存。
6. 相关产品推荐
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运输培养基：BD Cary-Blair、Thermo Scientific Amies Gel
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采集套装：Norgen Biotek粪便样本保存管、VWR无菌粪便容器
总结
通过选择合适的培养基（如Cary-Blair）并规范操作，可有效保持粪便样本中微生物的活性和完整性。关键控制点包括无菌采集、快速处理、稳定温度，适用于临床诊断、菌群研究和公共卫生调查。