细胞培养瓶的灭菌是保障细胞培养无污染的关键步骤。常用的灭菌方法包括高压蒸汽灭菌（高压锅灭菌）、干热灭菌和辐照灭菌。

一、高压蒸汽灭菌
这是最常用的方法，适用于耐高温的细胞培养瓶。通过121℃、15-20分钟的高压蒸汽处理，有效杀灭各种微生物。

二、干热灭菌
适用于耐高温且不能耐湿的培养瓶。通常在160-180℃下加热1-2小时完成灭菌，但不适合塑料材质的培养瓶。

三、辐照灭菌
利用γ射线或电子束灭菌，适合塑料培养瓶的无菌包装，灭菌彻底且不会损坏材料。

灭菌后，需保持无菌操作，避免二次污染，确保细胞培养顺利进行。